Crotapotina (CA da crotoxina) de Crotalus durissus terrificus: Estudos in vitro, in silico e imunológicos no contexto da leishmaniose e imunomodulação

Abstract

A leishmaniose é uma doença negligenciada de alta incidência no Brasil, especialmente na região Norte, onde persistem falhas terapêuticas e casos de resistência aos antimoniais pentavalentes, padrão preconizado pelo Ministério da Saúde. Esse cenário evidencia a urgência na busca por novas moléculas terapêuticas, mais eficazes e menos tóxicas. Neste trabalho, foi avaliado o potencial anti-leishmanicida e imunomodulador da Crotapotina, subunidade ácida e não tóxica da crotoxina do veneno de Crotalus durissus terrificus, por meio de abordagens in silico, in vitro e ensaios imunológicos. As análises in silico revelaram forte interação da Crotapotina com a Tripanotiona redutase de Leishmania braziliensis (ΔH médio de –15 kcal/mol) e estabilidade conformacional ao longo de 100 ns de dinâmica molecular. Os ensaios in vitro demonstraram inibição moderada da enzima recombinante (41% a 150 μg/mL; IC₅₀ = 223,5 μM) e baixa eficácia sobre amastigotas axênicas de L. amazonensis (41% de inibição). Por outro lado, os estudos imunológicos em PBMC humanos evidenciaram ausência de citotoxicidade (até 96 h), nenhuma indução significativa de espécies reativas de oxigênio (ROS) e baixos níveis de liberação de LDH. Notavelmente, a Crotapotina modulou a resposta imune, com liberação precoce de IL-1β (1–2 h) e aumento sustentado de IL-10 a partir de 24 h, com pico em 48 h, sugerindo uma ação pleiotrópica. Apesar da eficácia direta limitada contra o parasito, os dados obtidos indicam que a Crotapotina apresenta potencial imunomodulador relevante e merece ser explorada em modelos experimentais mais complexos como candidata a adjuvante ou protótipo terapêutico para leishmaniose.